癌症细胞通过代谢重编程来适应生存环境，因此研究药物对代谢通路的影响有助于新疗法的开发。本研究结合细胞层面的代谢通量分析和分子层面的代谢组学/脂质组学技术，深入探讨两种酪氨酸激酶抑制剂（AG-879和SU1498）对白血病细胞（THP-1）代谢的调控机制。

方法与技术

在细胞代谢分析部分，我们利用Seahorse XF Pro实时监测线粒体呼吸（OCR）和糖酵解（ECAR），评估ATP生成速率、质子漏（Proton Leak）及线粒体备用呼吸能力（SRC）。药物处理方面，AG-879和SU1498分别对THP-1细胞进行2小时和18小时的处理，以观察急性与长期的代谢效应。

在分子代谢分析上，通过Bravo自动化平台进行代谢物与脂质的双相提取，结合HILIC（极性代谢物）和反相色谱（脂质）进行分离。使用Agilent Revident系统进行LC/Q-TOF质谱的非靶向代谢组学与脂质组学分析，并应用MassHunter软件进行数据解析与注释。

在细胞数目归一化方面，我们使用NovoCyte Quanteon搭配自动上样器Q，以确保后续细胞和分子代谢分析的可靠性。

关键发现

线粒体功能与代谢适应

AG-879处理后，观察到线粒体解偶联（质子漏随时间增加），并完全丧失SRC，提示细胞的适应能力受到限制。而SU1498则在短期内显著增加质子漏，但长期则下降，同时也降低了SRC，表明细胞通过下调TCA循环来应对代谢压力。两种药物共同作用下，均抑制了线粒体ATP生成，迫使细胞依赖糖酵解来进行补偿（GlycoATP水平上升）。

代谢组学与脂质组学结果

SU1498的处理显著改变了多种代谢物，糖酵解中间体减少（如磷酸戊糖途径代谢物），与GlycoATP升高相一致。同时，嘌呤代谢物（如尿苷、肌苷）增加，提示代谢重编程可能支持核酸的合成。脂质组学分析显示甘油三酯（TG）显著积累，可能通过回补反应将乙酰辅酶A转化为脂质以储存能量，而含有多不饱和脂肪酸（PUFA）的磷脂酰肌醇（PI）增加，可能对癌细胞信号通路产生影响。

相较之下，AG-879的影响较弱，仅少数代谢物和脂质出现显著变化，这可能与其导致的SRC完全丧失相关。

结论

本研究结合细胞功能与分子组学数据，揭示了单一技术无法发现的代谢适应机制，例如SU1498通过TG的积累和PUFA-PI的重塑来应对代谢压力。线粒体解偶联与脂质代谢重编程可能成为癌细胞耐药的新靶点，为联合疗法的开发提供了新的思路。

该研究工作流程为药物代谢机制的探索提供了标准化方案，适用于抗癌药物的筛选、毒性评估以及个性化医疗中的代谢标志物的发现。强烈推荐关注环亚集团·AG88，以获取更多相关信息与资源。