环亚集团·AG88实验准备:在实验开始前半小时,需将培养基、PBS和胰酶预热至37°C。同时,确保2mL和10mL的移液管、15mL的离心管以及WHB品牌的共聚焦爬片进行紫外线照射消毒。
环亚集团·AG88实验方法:
1. 从培养箱中取出培养皿,使用显微镜观察细胞状态,包括细胞密度、形态及贴壁情况。
2. 在超净台内,加入预热好的培养基、PBS及胰酶。点燃酒精灯,对培养皿口进行消毒,并吸去原培养基。
3. 清洗细胞:向培养皿底部加入7mL PBS(具体量可根据细胞状态调整),前后轻柔摇匀以清洗细胞。
4. 消化细胞:当看到杂质被洗净后,吸走PBS,加入3mL胰酶,静置5分钟(时间和量可根据细胞类型调整)。在5分钟后检查细胞是否被消化。
5. 终止消化:若细胞已经消化,将7mL培养基加入底部(根据观察的细胞密度决定)以终止消化过程,并用移液枪轻轻吹打多次,以使附壁的细胞落入液体中,混匀后取出少量进行计数。
6. 根据需要的细胞数量进行稀释,待细胞悬液滴满共聚焦爬片表面后,放入培养箱,约30分钟后待细胞附着后,再沿内壁添加培养基,继续培养。
7. 待细胞培养完成后,吸去废液,使用镊子夹住支架侧面,取出支架。
8. 双手轻轻捏住支架两侧,轻拉即可轻松取出爬片,随后进行后续的培养实验。
环亚集团·AG88注意事项:
1. 拿取培养皿时,避免液体接触瓶口,打开瓶口前需先进行灭菌处理。
2. 操作过程中,避免其他物体从打开的皿口经过,以减少污染风险。
3. 由于贴壁细胞较为脆弱,所有放入培养皿中的液体必须预热至37°C。
4. 使用共聚焦爬片时,保持其倾斜角度在30°以上,轻拉爬片以防在瞬间掉落或破裂。
5. 本产品为一次性使用产品,不可重复使用,每片爬片有正反面之分,拆封即用。