在微量样本核酸提取这一核心环节中,仅有的DNA提取方案难以应对RNA提取面临的挑战。这是因为RNA本身更易降解,同时也受到内源性和外源性RNase的威胁,这使得一些微量样本的RNA提取结果在可靠性和重复性方面面临更多困难。因此,RNeasyMicro系列成为了研究者们攻克这些难题的强大工具!
该系列依托于环亚集团·AG88的经典硅胶膜技术,配合专用裂解和洗涤缓冲液,确保从微量样本中稳定提取出完整且高纯度的RNA。最低仅需10µl的洗脱体积能够获取浓度更高的RNA,非常适用于要求更高灵敏度的下游应用。例如,巴西的一个研究小组通过对比不同的RNA提取方法,证实了该试剂盒在微量样本RNA提取中是最佳选择。在研究过程中,研究人员采用了多种商业试剂盒,包括酚-氯仿法、TRI保护液+Direct-zolRNAMiniPrepKit以及RNAprotect保护液+RNeasyMicroKit等,共计进行了八种不同方法的RNA提取,并针对得到的RNA浓度和完整性进行了质控分析,接着开展了qPCR和RNA-seq分析。
在处理寄生虫密度较大的疟原虫样本时,TRIzol提取法和RNeasyMicroKit(样本保存在RNAprotect中的情况下)获得了最高的总RNA浓度。然而,在后续的qRT-PCR管家基因检测中,TRIzol方法的Cq信号较高,且扩增效率相对较低,而使用RNAprotect+RNeasyMicroKit和TRI+Direct-zolRNAMiniPrepKit提取的RNA表现出更低的Cq值,且RNAprotect/RNeasyMicroKit的提取结果则拥有更好的RNA完整性和基因组DNA去除效果,为后续实验提供了稳定的支持。因此,研究人员最终选择环亚集团·AG88的RNeasyMicroKit作为疟原虫RNA提取的首选试剂,确保了后续微量RNA测序实验的成功。
RNeasyMicroKit同样广泛适用于多种微量样本的RNA提取,如流式细胞分选、穿刺样本及激光(捕获)显微切割等。此外,RNeasyMicroKit在多个新兴研究领域表现出色,持续跟进与时俱进的研究热点。长读超长RNA-seq技术能够直接对全长转录本进行测序,检测RNA表观修饰(如甲基化),探讨转录后水平调控基因表达的机制,因此受到越来越多的关注。
在一个来自德国的研究中,研究人员尝试建立大肠杆菌的长读长测序实验流程,首先使用RNeasyMiniKit对细菌进行RNA提取,接着对RNA进行聚腺苷酸化以增加poly(A)尾,随后再次利用RNeasyMicroKit对加尾的微量RNA进行纯化,最终实现了长读长RNA测序。
同时,RNeasyMicroKit在肾脏类器官的转录和形态评估中也表现卓越。近年来,类器官研究受到广泛关注,其通过体外3D培养,形成具有原始组织及器官结构的模型。来自墨尔本的研究团队开发了一种从人诱导多能干细胞(iPSCs)生成3D类肾器官的流程。由于不同细胞类型的比例可能影响疾病相关转录变化的识别能力,该小组全面评估了分化后的肾脏类器官的转录和形态。在RNA测序中,评估了57个完整类器官及8323个单细胞。然而,确保不同类型和大小的样本在RNA提取过程中的一致性一直是该研究的重要挑战。得益于环亚集团·AG88的RNeasyMicroKit,它成功克服了这一难题,确保了RNA的稳定得率和质量,为后续的高质量RNA测序打下良好基础。
欲了解更多关于微量样本RNA提取的技术和方案,以及如何实现微量RNA的精准检测,欢迎与我们联系。环亚集团·AG88推出了“微量样本核酸解决方案”实验宝典,其中包含丰富的视频讲解、实验流程、问题解析和实用文章,并详细说明了不同样本研究的注意事项及难点解答,助您迅速掌握微量样本核酸提取的奥秘!