新生儿坏死性小肠结肠炎（NEC）是一种常见的致命性肠道疾病，特别在早产儿中发病率较高，但其发病机制尚未完全理解。近期，《Immunity》期刊发表的一项研究揭示了胆汁酸受体FXR在NEC发展中的重要作用，强调了其在调控肠道上皮细胞铁死亡及ILC3功能失调中的分子机制，为潜在的治疗靶点提供了新的视角。

核心实验技术

本研究结合了多组学技术和先进的分子生物学手段，以层层验证科学假说：

• 单细胞RNA测序（scRNA-seq）用于分析NEC小鼠肠道上皮细胞（IECs）的转录组异质性，发现FXR在肠细胞中高表达。
• 流式细胞术结合分选技术检测IECs中的FXR蛋白，并对特定ILC3细胞（CD45⁺Lin⁻CD902⁺CD127⁺KLRG1⁻）进行功能分析。
• 设计多重荧光免疫组化（mIHC）探究FXR与脂质过氧化的关系，揭示NEC患者肠道FXR与氧化损伤的时空关联。
• 脂质组学（LC-MS/MS）定量分析磷脂过氧化物，验证FXR通过上调ACSL4促进铁死亡。
• 构建肠道特异性FXR敲除小鼠（Fxr^AlEC），并结合NEC诱导模型进行实验。
• 利用染色质免疫沉淀（ChIP）与荧光素酶报告实验验证FXR直接结合ACSL4启动子调控其转录活性。

样本分组逻辑

研究通过临床队列与动物模型进行双向验证：

• 临床样本：NEC组包含6例手术诊断的NEC患儿（血浆及肠道组织），对照组为6例年龄匹配的非NEC患儿。
• 小鼠实验：基因型分组为Fxr^AlEC（肠道FXR敲除）与Fxr^fl/fl（野生型对照），而干预分组包括FXR调控（激动剂Fexaramine与拮抗剂Gly-β-MCA）和铁死亡干预（Liproxstatin-1和ACSL4抑制剂PRGL493）。

颠覆性结论

该研究得出了几个重要结论：

• FXR被确定为NEC的关键驱动因子，NEC患儿的肠道FXR表达明显升高，与血浆FGF19呈正相关，提示FXR的激活可能加重疾病。
• 微生物与上皮细胞间的相互作用失衡，NEC相关的菌群失调导致短链脂肪酸（SCFAs，如丁酸）的减少，从而解除对FXR的抑制，进而引发肠上皮的铁死亡。
• 铁死亡通过ILC3轴加重炎症，FXR激活ACSL4，促进脂质过氧化与铁死亡，而死亡的上皮细胞释放的氧化磷脂抑制ILC3分泌IL-22，削弱肠道屏障的修复功能。
• 研究建议通过靶向抑制肠道FXR、ACSL4或铁死亡可显著减轻小鼠NEC症状，提高生存率超过50%。

临床转化启示

该研究为后续的临床应用提供了重要启示：

• 血浆FGF19和脂质过氧化物可作为NEC的早期诊断标志物。
• 治疗方向应集中于开发肠道特异性FXR拮抗剂（如Gly-β-MCA）或铁死亡抑制剂，同时可考虑通过益生菌或丁酸来调节菌群。

总结来说，这项研究首次揭示了FXR-铁死亡-ILC3轴在NEC中的关键作用，为深入理解肠道炎症的分子机制提供了新的视角，同时为临床干预提供了精准的靶点。这种多组学技术和跨物种模型的结合，展示了转化医学研究的巨大潜力。

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