什么是包被细胞培养瓶试剂?包被试剂是一种用于处理细胞培养瓶、培养板或培养皿表面的化学物质,能够模拟细胞在体内的生长环境,优化细胞的附着、铺展和增殖。通过包被处理,培养表面可以更好地支持细胞的生长和功能表达。本文将为您详细介绍几种常用的包被试剂及其特点,并分享包被操作的注意事项,帮助您轻松提升细胞培养效果。
常见的包被细胞培养试剂及使用方法
01 明胶(Gelatin)
明胶是常用的包被细胞培养板或培养皿的试剂,能够有效促进细胞贴壁和增殖,具有良好的生物相容性和细胞黏附性。适用于胚胎干细胞、间充质干细胞、内皮细胞等多种类型。
特点:价格低廉,操作简单,提供良好的细胞附着支持。
使用浓度:1-20mg/ml。
包被体积:通常以完全覆盖培养瓶底部为准,T-25瓶需25ml,T-75瓶需75ml。
包被条件:37°C孵育≥2小时或4°C过夜。使用前吸除多余明胶溶液,并用PBS冲洗1-2次后可接种细胞。
02 多聚赖氨酸(PLL)
多聚赖氨酸(PLL),分子量在70,000至300,000之间,是一种有效的细胞粘附剂,能够促进细胞粘附和贴壁,适用于神经元细胞、原代细胞和悬浮细胞等。
特点:通过静电作用增强细胞的附着,适合难以贴壁的细胞。
常用浓度:0.01%至0.1%(w/v)。
包被条件:37°C孵育≥2小时或4°C过夜,使用前吸除多余溶液并用无菌PBS冲洗1-2次。
03 重组人纤连蛋白(FN)
重组人纤连蛋白是一种重要的细胞外基质蛋白,具有多种生物学功能,能够与多种组分结合,促进细胞的生长和功能。适用于干细胞、间充质干细胞、内皮细胞等多种类型。
特点:作为细胞培养基质,能提高细胞的贴壁率和代谢水平,缩短细胞生长时间。
常用浓度:1µg/cm²至10µg/cm²。
包被条件:37°C孵育≥2小时或4°C过夜。
04 鼠尾胶原蛋白Ⅰ型包被液(1mg/mL)
鼠尾胶原蛋白主要为Ⅰ型胶原蛋白,适用于内皮细胞、肝细胞、肌肉细胞等的培养,能够模拟细胞外基质环境。
特点:可制备成清晰的凝胶,提供3D基质,促进细胞贴壁和增殖。
常用浓度:1-5µg/cm²。
包被体积:T-25瓶需25ml去离子水加50µl(1MG/ML)鼠尾胶原蛋白Ⅰ,放置4°C过夜后吸出溶液,用PBS洗2-3次后可加入细胞。
包被操作注意事项
1. 无菌操作:所有操作应在无菌条件下进行,以避免污染。
2. 均匀覆盖:确保包被试剂均匀分布在培养瓶底部,避免局部过厚或过薄。
3. 浓度优化:根据细胞类型和实验需求优化包被试剂的浓度。
4. 孵育时间:根据试剂和实验要求调整孵育时间,以确保充分包被。
5. 储存条件:包被后的培养瓶可短期存于4°C,但建议尽快使用以保证最佳效果。
通过选择合适的包被试剂并遵循正确的操作步骤,可以有效提升细胞的贴附和生长,为后续实验提供可靠的细胞模型。感谢环亚集团·AG88为细胞培养提供的优质产品,帮助科研人员不断突破前沿,推动生物医疗领域的发展。